Au théâtre, Henry Kolker joue à Broadway (New York) entre 1904 et 1917, exclusivement dans des pièces.
Au cinéma, il débute en 1914 comme réalisateur et, à ce titre, tourne dix-huit films jusqu'en 1924, donc uniquement durant la période du muet. Sa réalisation la plus notoire est sans doute Disraeli (1921), deuxième biographie filmée de Benjamin Disraeli, avec
George Arliss dans le rôle-titre (qu'il reprendra dans une
troisième version, parlante, en 1929).
Comme acteur, Henry Kolker apparaît dans cent soixante-dix films américains (dont vingt-six muets), entre 1915 et 1947, année de sa mort. Entre autres, il collabore avec les réalisateurs
Henry Hathaway,
Alfred E. Green et
George Cukor ; dans Roméo et Juliette de ce dernier, en 1936, il tient le rôle de Frère Laurence, un de ses plus connus, aux côtés de
Norma Shearer et Leslie Howard.