Rosario Dawson est née et a grandi à New York. Sa carrière cinématographique commence à l'improviste, lorsqu'en 1995 le réalisateur Larry Clark la rencontre dans une rue du quartier new-yorkais de Manhattan. Clark lui demande de participer au film qu'il est en train de tourner, Kids. Le succès critique du film décide Rosario à débuter une carrière d'actrice. Elle s'inscrit alors à l'Institut théâtral de Lee Strasberg (Lee Strasberg Theatre and Film Institute). Par la suite, elle tourne régulièrement, et ses prestations sont souvent remarquées. Dawson a travaillé avec des réalisateurs reconnus comme Oliver Stone, Quentin Tarantino, Robert Rodriguez et Spike Lee ; elle a partagé l'affiche avec, entre autres, Will Smith, Kurt Russell, Russel Crowe,Robert Downey Jr., Edward Norton, The Rock, Bruce Willis, Jessica Alba, Angelina Jolie, Clive Owen, Denzel Washington,Chris Pine et Jeff Wincott. Rosario Dawson a également participé à des projets discographiques, notamment avec Prince, sur l'album 1999 The New Master. Pour le nouvel album West Ryder Pauper Lunatic Asylum du groupe britannique Kasabian en 2009, on peut l'entendre dans le duo avec le chanteur Tom Meighan sur le titre West Ryder Silver Bullet. Enfin, elle prête sa voix en 2009 au personnage de la strip-teaseuse Velvet Von Black, dans le film d'animation The Haunted World of El Superbeasto, sous la direction de Rob Zombie. Elle s'est plainte des canons de beauté à Hollywood, qui la feraient passer pour « grosse et vieille » (31 ans à l'époque de la déclaration).
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“ J'emmerde Norton, j'emmerde Dawson, j'emmerde Lee et sa 25ème heure. En fait non, j't'emmerde toi Zed, pas foutu de trouver une MC originale ”— 187 9 octobre 2013
“ L'hypnose au manette de l’envoûtante R.Dawson et d'une histoire qui nous entraîne dans un tourbillon abracadabrantesque. Jubilatoire ! ”— Bully12 octobre 2013
“ Hypnotisant, électrisant. Si j'entretenais une passion amoureuse avec Rosario Dawson, j'aurais probablement le cerveau tout retourné aussi. ”— dr-jaws13 mai 2013