Beatrice Arthur est née à New York mais a grandi au Maryland. Elle débute sa carrière au théâtre dans les années 1940. Elle est remarquée en 1954 à Broadway dans l'adaptation anglaise de L'Opéra de quatre sous (The Threepenny Opera en anglais) de Bertold Brecht et Kurt Weill , aux côtés de
Lotte Lenya. En 1956-1957, elle effectue des apparitions régulières dans l'émission du comique
Sid Caesar, Caesar's Hour.
Toujours à Broadway, elle crée le rôle de Yente dans Un violon sur le toit de Joseph Stein, Jerry Bock et Sheldon Harnick en 1964 avec
Zero Mostel, puis celui de Vera Charles dans Mame de Jerry Herman, Jerome Lawrence et Robert E. Lee en 1966 aux côtés de
Angela Lansbury, rôle qu'elle reprendra au cinéma en 1974.
Mais c'est le petit écran qui la révèle véritablement au grand public avec le rôle de Maude Finley dans la série All in the family en 1971. Son succès est tel qu'elle se voit offrir sa propre série dérivée (spin-off), simplement intitulée Maude, diffusée de 1972 à 1978 et qui sera adaptée en France sous le titre Maguy avec
Rosy Varte dans les années 1980.
Sept ans plus tard, elle décroche le rôle de Dorothy Zbornak dans The Golden Girls (Les Craquantes en VF), diffusé de 1985 à 1992. La série qui rencontre un énorme succès ne s'interromp qu'avec le départ de l'actrice qui souhaite passer à autre chose. Elle fait ensuite plusieurs apparitions dans des séries, notamment Malcolm, puis monte un one-woman show qu'elle joue à travers les États-Unis.
Elle meurt à son domicile de Los Angeles des suites d'un cancer. Son décès intervient un peu moins d'un an après celui d'
Estelle Getty, qui incarnait son espiègle et débridée maman dans The Golden Girls, alors que les deux comédiennes n'avaient qu'un an d'écart dans la vraie vie (Beatrice Arthur étant la plus âgée).
Elle a été mariée successivement au scénariste-producteur Robert Alan Aurthur et au réalisateur et metteur en scène
Gene Saks dont elle a divorcé en 1978. Elle a deux fils, Matthew (né en 1961) et Daniel (né en 1964), adoptés durant son deuxième mariage.