Issue d'une famille qui remonte sa généalogie à Guillaume Courau, né à Saint-André-de-Cubzac en 1627, elle est la fille de Jean-Claude Courau, ingénieur, et de Catherine du Pontavice, institutrice dans les Hauts-de-Seine. Elle passe son enfance avec ses parents et ses trois soeurs, Christine, Camille et Capucine, entre l'Égypte et le Bénin. En 1985, âgée de 16 ans, elle abandonne ses études et décide de devenir comédienne. Elle s'inscrit aux cours Simon, aux cours Florent, à l'École de la rue Blanche (ENSATT), ainsi qu'à l'Atelier International de Théâtre, à Paris, tout en faisant des petits boulots (coller des affiches pour une marque de cigarettes, femme de ménage, shampouineuse, ...) et débute au théâtre dans la compagnie Francis Huster aux côtés, notamment, de Cristiana Reali, Valentine Varela, Valérie Crunchant, Estelle Skornik, et Olivier Martinez. En 1990, elle fait ses premiers pas au cinéma avec Le Petit Criminel de Jacques Doillon, pour lequel elle est récompensée du Prix de la meilleure actrice au Festival international du film de Berlin (Berlinale) et une nomination pour le César du cinéma pour le César du meilleur espoir féminin. Elle devient une des nouvelles coqueluches du cinéma français et enchaîne une importante série de films dans de nombreux registres tout en jouant au théâtre. En 1995, elle tourne dans Élisa de Jean Becker et reçoit le Prix de la Société des auteurs et compositeurs dramatiques (SACD), ainsi que deux nominations pour les César du cinéma (meilleur espoir féminin et meilleure actrice dans un second rôle. Elle reçoit en 1995 le Prix Suzanne-Bianchetti (jeune actrice la plus prometteuse) et en mars 2000 le Prix Romy-Schneider (meilleur espoir féminin du cinéma français). Elle partage un temps la vie de l'acteur Guillaume Depardieu, puis elle épouse Emanuele Filiberto di Savoia le 25 septembre 2003 à la basilique Sainte-Marie-des-Anges-et-des-Martyrs à Rome. Elle donne naissance à Vittoria le 28 décembre 2003 à Genève et à Luisa le 16 août 2006, toujours à Genève. Elle continue depuis sa carrière d'actrice et de comédienne avec succès entre l'Italie et la France. Le 8 juin 2010, elle annonce dans les colonnes du Parisien qu'elle sera meneuse de revue au Crazy Horse du 19 au 29 septembre 2010.
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“ Road movie social dirigé par un Doillon décidément maître dans la direction d'acteurs. Anconina, Thomassin & Courau forment un trio émouvant ”— PumpUpTheJam 5 décembre 2015
“ Étonnamment, j'ai surtout retenu Clotilde Courau dans ce film. Paradis est jolie mais pas vraiment poignante, pas assez pour être crédible. ”— Attrianera27 août 2016
“ Dans l'ombre de la domination masculine, Clotilde Courau rayonne comme rarement auparavant. Le film ne tient que grâce à sa sensibilité. ”— A_Nos_Amours27 mai 2015
“ Clotilde Courau sauve à elle seule le film, en lui donnant une épaisseur, une fragilité et une force qui sans elle serait un naufrage. ”— ElFeo30 mai 2015